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微生物實驗室建設
微生物實驗室準備室、滅菌室、無菌室、恒溫培養室和普通實驗室五部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁的質地光滑堅硬，儀器和設備的陳設簡潔，便于打掃衛生。
微生物實驗室基本要求如下：
（一）準備室
準備室用于配制培養基和樣品處理等。室內設有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。
準備室還要用于洗刷器皿等。室內應備有加熱器、蒸鍋，洗刷器皿用的盆、桶等，還應有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。
（二）滅菌室
滅菌室主要用于培養基的滅菌和各種器具的滅菌，室內應備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設備及設施。
（三）無菌室
無菌室也稱接種室，是系統接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。在微生物工作中，菌種的接種移植是一項主要操作，這項操作的特點就是要保證菌種純種，防止雜菌的污染。在一般環境的空氣中，由于存在許多塵埃和雜菌，很易造成污染，對接種工作干擾很大。
1. 無菌室的設置
無菌室應根據既經濟又科學的原則來設置。其基本要求有以下幾點：
（1）無菌室應有內、外兩間，內間是無菌室，外間是緩沖室。房間容積不宜過大，以便于空氣滅菌。最小內間面積2×2.5＝5m2，外間面積1×2＝2m2，高以2.5m以下為宜，都應有天花板。
（2）內間應當設拉門，以減少空氣的波動，門應設在離工作臺最遠的位置上；外間的門最好也用拉門，要設在距內間最遠的位置上。
（3）在分隔內間與外間的墻壁或“隔扇”上，應開一個小窗，作接種過程中必要的內外傳遞物品的通道，以減少人員進出內間的次數，降低污染程度。小窗寬60cm、高40cm、厚30cm，內外都掛對拉的窗扇。
（4）無菌室容積小而嚴密，使用一段時間后，室內溫度很高，故應設置通氣窗。通氣窗應設在內室進門處的頂棚上（即離工作臺最遠的位置），最好為雙層結構，外層為百葉窗，內層可用抽板式窗扇。通氣窗可在內室使用后、滅菌前開啟，以流通空氣。有條件可安裝恒溫恒濕機。
2. 無菌室內設備和用具
（1）無菌室內的工作臺，不論是什么材質、用途的，都要求表面光滑和臺面水平。
（2）在內室和外室各安裝一個紫外燈（多為30W）。內室的紫外線燈應安裝在經常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室中央。
（3）外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、盛有來蘇兒水的瓷盆和毛巾、手持噴霧器和5%石炭酸溶液等。
（4）內室應有酒精燈、常用接種工具、不銹鋼制的刀、剪、鑷子、70%的酒精棉球、工業酒精、載玻璃片、特種蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢物筐等。
3. 無菌室的滅菌消毒
（1）薰蒸：這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室使用了較長時間，污染比較嚴重時，應進行薰蒸滅菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。
（2）噴霧：在每次使用無菌室前進行。噴霧可促使空氣中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微塵飛場，并有殺菌作用。可用5%石炭酸噴霧。
（3）紫外線照射：在每次使用無菌室前進行。紫外線有較好的殺菌效果。通常應開啟紫外線燈照射30～60min。
4. 無菌室工作規程
（1）無菌室滅菌。每次使用前開啟紫外線燈照射30min以上，或在使用前30min，對內外室用5%石炭酸噴霧。
（2）用肥皂洗手后，把所需器材搬入外室；在外室換上已滅菌的工作服、工作帽和工作鞋，戴好口罩，然后用2%煤酚皂液將手浸洗2分鐘。
（3）將各種需用物品搬進內室清點、就位，用5%石炭酸在工作臺面上方和操作員站位空間噴霧，返回外室，5～10min后再進內室工作。
（4）接種操作前，用70%酒精棉球擦手；進行無菌操作時，動作要輕 緩，盡量減少空氣波動和地面揚塵。
（5）工作中應注意安全。如遇棉塞著火，用手緊握或用濕布包裹熄滅，切勿用嘴吹，以免擴大燃燒；如遇有菌培養物灑落或打碎有菌容器時，應用浸潤5%石炭酸的抹布包裹后，并用浸潤5%石炭酸的抹布擦拭臺面或地面，用酒精棉球擦手后再繼續操作。
（6）工作結束，立即將臺面收拾干凈，將不應在無菌室存放的物品和廢棄物全部拿出無菌室后，對無菌室用5%石炭酸噴霧，或開紫外線燈照射30min。
（四）恒溫培養室
1. 培養室的設置
（1）培養室應有內、外兩間，內室是培養室，外室是緩沖室。房間容積不宜大，以利于空氣滅菌，內室面積在3.2×4.4＝14m2左右，外室面積在3.2×1.8＝6m2左右，高以2.5m左右為宜，都應有天花板。
（2）分隔內室與外室的墻壁上部應設帶空氣過濾裝置的通風口。
（3）為滿足微生物對溫度的需要，需安裝恒溫恒濕機。
（4）內外室都應在室中央安裝紫外線燈，以供滅菌用。
2. 培養室內設備及用具
（1）內室通常配備培養架和搖瓶機（搖床）。常用的搖瓶機有旋轉式、往復式兩種。
（2）外室應有專用的工作服、鞋、帽、口罩、手持噴霧器和5%石炭酸溶液、70%酒精棉球等。
3. 培養室的滅菌、消毒
同無菌室的滅菌、消毒措施。
小規模的培養可不啟用恒溫培養室，而在恒溫培養箱中進行。
（五）普通實驗室
進行微生物的觀察、計數和生理生化測定工作的場所。室內的陳設因工作側重點不同而有很大的差異。一般均配備實驗臺、顯微鏡、柜子及凳子。實驗臺要求平整、光滑，實驗柜要足以容納日常使用的用具及藥品等
微生物學實驗室主要設備
（一）凈化工作臺
凈化工作臺是一種局部層流裝置，能在局部形成高潔度的工作環境。它由工作臺、過濾器、風機、靜壓箱和支撐體等組成，采用過濾空氣使工作臺操作區達到凈化除菌的目的。室內空氣經預過濾器和高效過濾除塵后以垂直或水平層流狀態通過工作臺的操作區，由于空氣沒有渦流，所以，任何一點灰塵或附著在灰塵上的雜菌都能被排除，不易向別處擴散和轉移。因此，可使操作區保持無菌狀態。 與無菌室和接種箱比較，使用凈化工作臺具有工作條件好、操作方便、無菌效果可靠、無消毒藥劑對人體危害、占用面積小且可移動等優點。如果放在無菌室內使用，無菌效果更好。其缺點是價格昂貴，預過濾器和高效過濾器還需要定期清洗和更換。
（二）高壓蒸汽滅菌鍋
高壓蒸汽滅菌鍋是一個密閉的、可以耐受一定壓力的雙層金屬鍋。鍋底或夾層內盛水，當水在鍋內沸騰時由于蒸汽不能逸出，使鍋內壓力逐漸升高，水的沸點和溫度可隨之升高，從而達到高溫滅菌的目的。一般在0.11MPa的壓力下，121℃滅菌20~30min，包括芽孢在內的所有微生物均可被殺死。如果滅菌物品體積較大，蒸汽穿透困難，可以適當提高蒸汽壓力或延長滅菌時間。 高壓滅菌鍋有臥式、立式、手提式等多種類型，在微生物學實驗室，最為常用的是手提式和立式高壓蒸汽滅菌鍋。和常壓滅菌鍋相比，高壓滅菌鍋的優點是滅菌所需的時間短、節約燃料、滅菌徹底等。其缺點是價格昂貴，滅菌容量較小。
（三）培養箱
培養箱是培養微生物的專用設備。制熱式培養箱是由電爐絲和溫度控制儀合成的固定體積的恒溫培養裝置，大小規格不一。微生物實驗室常用的培養箱工作容積有450×450×350mm3或650×500×500mm3，適用于室溫至60℃之間的各類微生物培養。目前，隨著科學水平的發展，培養箱設備的完善程度和價格有很大差別。有各種結構合理、功能齊全的培養箱，如恒溫培養箱、恒溫恒濕培養箱、低溫培養箱、微生物多用培養箱和二氧化碳培養箱等。有的用計算機控制，可選擇多條時間線變換溫差，從而克服了環境溫度的影響，一年四季均能達到培養要求的溫度。 微生物多用培養箱是集加熱、制冷和振蕩于一體的微生物液體發酵裝置。工作室的溫度在15~50℃范圍內任意選定，選定后經溫控儀自動控制，保持工作室內恒溫。同時設有可控硅調速系統，振蕩機轉速可在1~220rpm范圍內任意調控。
（四）干燥箱
干燥箱是用于除去潮濕物料內及器皿內外水分或其它揮發性溶液的設備。類型很多，有箱式、滾筒式、套間式、回轉式等。微生物學實驗室多用箱式干燥箱，大小規格不一。工作室內配有可活動的鐵絲網板，便于放置被干燥的物品。制熱升溫式干燥箱也是有電爐絲和溫度控制儀組成，可調節溫度從室溫至300℃任意選擇。有的干燥箱采用導電溫度計為敏感元件，配合晶體管和繼電器組成自動控制系統，克服了金屬管型熱膨脹控制的缺點。 此外，還有真空干燥箱(配有真空泵和氣壓表)，可在常壓或減壓下操作。
（五）搖床
搖床又稱搖瓶機，它是培養好氣性微生物的小型試驗設備或作為種子擴大培養之用，常用的搖床有往復式和旋轉式兩種。往復式搖床的往復頻率一般在80~140次/min，沖程一般為5~14cm，如頻率過快、沖程過大或瓶內液體裝量過多，在搖動時液體會濺到包扎瓶口的紗布或棉塞上，導致雜菌污染，特別是啟動時更容易發生這種情況。 旋轉式搖床的偏心距一般在3~6cm之間，旋轉次數為60~300rpm。放在搖床上的培養瓶（一般為三角瓶）中的發酵液所需要的氧是由空氣經瓶口包扎的紗布(一般8層)或棉塞通入的，所以氧的傳遞與瓶口的大小、瓶口的幾何形狀、棉塞或紗布的厚度和密度有關。在通常情況下，搖瓶的氧吸收系數取決于搖床的特性和三角瓶的裝樣量。 往復式搖床是利用曲柄原理帶動搖床作往復運動，機身為鐵制或木制的長方框子，有一層至三層托盤，托盤上有圓孔備放培養瓶，孔中凸出一個三角形橡皮，用以固定培養瓶并減少瓶的振動，傳動機構一般采用二級皮帶輪減速，調換調速皮帶輪可改變往復頻率。偏心輪上開有不同的偏心孔，以便調節偏心距。往復式搖床的頻率和偏心距的大小對氧的吸收有明顯的影響。 旋轉式搖床是利用旋轉的偏心軸使托盤擺動，托盤有一層或兩層，可用不銹鋼板、鋁板或木制板制造。在三個偏心軸上裝有螺栓可調節上下，使托盤保持水平。這種搖床結構復雜，造價高。其優點是氧的傳遞較好、功率消耗小、培養基不會濺到瓶口的紗布上。
